柯勒（August Kohler），这位十九世纪末蔡司厂的杰出工程师，因其在光学领域的卓越贡献而被后人铭记。为了纪念他，将他所发明的二次成像技术命名为柯勒照明。1893年，柯勒率先研发出一种卓越的照明方法，此方法能为样品提供最佳的照明效果。由于其能使样品获得均匀且明亮的光照，同时避免了刺眼的眩光，因此，近代的实验室显微镜制造厂均纷纷采用此技术，从而使得显微镜的使用者能够充分发掘其潜在能力。

柯勒照明的优势在于：

它成功克服了临界照明的不足，成为研究用显微镜的理想照明方式。这种照明法不仅观察效果卓越，而且是显微摄影不可或缺的关键技术。

1. 灯丝不直接落在被检物平面上，确保了照明的均匀性；

2. 热焦点不在被检物上，有效避免了被检物因过热而受损；

3. 聚光镜巧妙地将视场光阑成像在被检物平面处，通过调整其大小可精确控制照明范围。

柯勒照明的原理如下：

光源的灯丝经过聚光镜前组（科勒镜）后，灯丝的像首次落在聚光镜后组（成像物镜）的物方焦点处。随后，成像物镜再次将灯丝的像成像在像方无穷远处。这样，在被检物体的平面处就不会形成灯丝的像，从而确保了观察的清晰度。同时，照明效果也变得更为均匀。在观察时，可以通过调整聚光镜孔径光阑的大小，使光源完全覆盖不同物镜的入射光瞳，实现聚光镜与物镜数值孔径的匹配。此外，聚光镜还能将视场光阑成像在被检物体的平面处，通过改变视场光阑的大小，可以灵活控制照明范围。

柯勒照明的调节方式如下：

1. 取切片样品，在10倍物镜下进行清晰聚焦；

2. 将视场光阑调至最小，通过上下调节聚光镜，直至在视场中可以看到光阑边缘的清晰成像；

3. 调整聚光镜的对中螺丝，使光阑大致位于视场中央，然后逐步放大视场光阑，通过精细调节确保光阑像与视场外切；

4. 当更换其他物镜时，需根据物镜的NA值调节聚光镜孔径光阑的数值（通常为物镜NA值的0.7倍）。在实际使用中，为获得更大的景深，可适当缩小孔径光阑的数值。