暗场观察（Dark field），是一种特殊的显微镜观察技术，其特点在于利用斜射照明法阻挡透过标本细节的直射光，以反射光和衍射光来观察标本。这种方式可以观察到被检物体反射或衍射的光线，而视场则成为黑暗的背景，使得被检物体呈现明亮的图像。

暗视野的原理是根据光学上的丁道尔现象，微尘在强光直射通过的情况下，人眼不能观察，这是因为强光绕射造成的。若把光线斜射它，由于光的反射，微粒似乎增大了体积，为人眼可见。暗视野观察所需要的特殊附件是暗视野聚光镜。它的特点是不让光束由下至上的通过被检物体，而是将光线改变途径，使其斜射向被检物体，使照明光线不直接进入物镜，利用被检物体表面反射或衍射光形成的明亮图象使得暗视野观察的分辨率远高于明视野观察。

暗场显微镜在多个领域都有重要的应用。在胶体化学领域中，它适用于观察原虫、细菌的鞭毛、伪足运动。在医学检验学范围中，它可用于观察人体体液中的螺旋体、尿管形、结晶或各种粒子。在临床上，暗场显微镜常用于检查苍白螺旋体，对早期梅毒的诊断具有重要意义。

综上所述，对于暗场观察其

优点：可以观察在普通明场中看不见的微小标本(如细菌、微粒等),分辨率可达20nm~4nm,超显微观测。

缺点：只能观察到物体存在、外部轮廓、运动状态等；物镜使用的局限，不方便调节；

对标本要求较高(灰尘、盖片、载片等)。

应用：微小粒子、细菌形态观察、细菌记数，透明标本观察等。